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植物组织培养培养失败长出杂菌
1、原因：一是接种材料(外植体)带菌。二是培养基、接种器具带菌。三是操作人员接种不规范引起。细菌污染症状：培养基或外植体上出现粘液状或水迹状物，有强烈的酸臭味，多在污染后2－3天内发生。原因：外植体灭菌不彻底；培养基灭菌不彻底；接种用具灭菌不彻底；母瓶带菌。
2、在植物组织培养过程中，用到富含营养物质的培养基，这是培养物得以生长。但在培养过程中，由于外植体带菌、培养瓶和各种器械面均不彻底、操作人员操作不规范等原因，使得许多杂菌进入培养基中，并在上面迅速生长。
3、组织培养过程中各技术环节操作不规范 - 培养基：使用长菌的母液配制培养基，培养基pH值高、添加的有机成分均可导致细菌污染。培养基分装好后没有及时封口或封口后没有立即灭菌，培养容器口没有封严导致灭菌后细菌和真菌孢子再次进入培养容器使培养基污染。
4、第一个问题：不一定，不同的植物以及植物的不同器官，还有器官的成熟度不同，时间都不一样，从1天到1个礼拜的都有 第二个问题：不行，因为一个是菌会进去，再一个是生长素没办法混匀加，会有局部过量抑制生长的问题。
5、杂菌污染是造成组织培养失败的主要原因之一。杂菌污染的危害主要在于：产生有毒物质、消耗营养成分、菌体菌丝覆盖组织块造成组织块生长不良。
6、培养温度：25℃加减2℃ 注意无菌操作，培养物及培养基是否染菌。长毛的是霉菌或真菌，一般为环境消毒不彻底造成；稀汤的是细菌，一般为操作不规范导致。使用的镊子和刀等，在加热消毒后没有完全晾凉，就接触植物，植物组织被烫死，植物呈现发黑腐烂的现象一般是这么造成的。植物组织褐化。
琼脂可以用来做组织培养吗?
1、可以。琼脂的最有用特性是它的凝点和熔点之间的温度相差很大。它在水中需加热至95℃时才开始熔化，熔化后的溶液温度需降到40℃时才开始凝固，所以它是配制固体培养基的最好凝固剂。用琼脂配制的固体培养基，可用以进行高温培养而不熔化，在凝固之前接种时，也不致将培养物烫死。
2、常用的凝固剂是琼脂。琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖，绝大多数微生物都不能分解利用它。琼脂的熔点为96℃，凝固点为40℃，因此，在一般的培养条件下都呈固体状态，而且透明度强。正是这些优良特性，使琼脂取代了早期使用的明胶而成为常用的凝固剂。
3、一般来说，植物培养使用固体培养基，所以里面需要加入琼脂，一般每升加入6到8克琼脂粉即可（培养基pH会影响琼脂凝固效果，低了不易凝固，高了则过硬，一般在5-8之前问题不是太大）。此外，培养基中需要加入碳源，一般使用蔗糖或者葡萄糖。
4、另外，琼脂也是最常用的有机附加物，它主要是作为培养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。生长调节物质常用的生长调节物质大致包括以下三类：(1)植物生长素类。如吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）。(2)细胞分裂素。
5、植物组织培养可以分为四个阶段：（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。
6、琼脂白糖福尔马林高锰酸钾(可以到医院或药材商店去买)微量元素、铁盐、维生素类以及激素类 应用量极少。比如一些激素、维生素类的 及有针剂也有片剂，他们都有比较准确的含量，你可以去按你的需要去配制比例。
琼脂在培养基中的作用
琼脂在培养基中的作用是作为凝固剂。培养基是供微生物、植物动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有含氮物质、碳水化合物、无机盐、水、维生素等。在培养基中，琼脂作为凝固剂来将液体培养基转化为固体培养基或半固体培养基。它最主要的作用是使液体培养基凝固。
琼脂在固体培养基中的作用：琼脂化学结构稳定，不易被菌丝分解利用，在培养基中仅起凝固剂的作用，其在96℃时融化成液体，冷却到45℃以下即重新凝固。琼脂作为凝固剂的优点：由于用琼脂配制的固体培养基清晰透明，便于观察菌丝的形态，故成为常规斜面域平板培养基不可缺少的材料。
凝固性：琼脂在适当温度下可以凝固成为凝胶状物质，使得培养基能够固化成为固体形态。这种凝固性是琼脂在培养基中起到固化作用的基础。透明性：琼脂具有一定的透明性，使得培养基中的细菌或细胞可以在其上生长和观察。透明的琼脂可以提供一个良好的观察平台，便于观察和分析生物样品。
在固体培养时琼脂是最好的固体剂。它最主要的作用是使液体培养基凝固，有一些报告提到采用滤纸、玻璃球、玻璃棉、石英沙、蛭石、明胶、硅胶、丙烯酰胺、泡沫塑料、甚至南瓜、马铃薯等来代琼脂，然而直到目前为此，比琼脂更方便和更好的支持物仍未发现。
该配方琼脂最后一步加入是它需要在加热时融化。琼脂是一种从海藻中提取的天然多糖，具有很好的凝固性。在制作培养基的过程中，需要将琼脂与其它成分混合加热，使其融化后才能形成均匀的溶液。如果提前加入琼脂，它可能会在加热过程中结块或不均匀地分布，导致培养基的质量受到影响。
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